Características de los métodos cromatográficos

La característica que distingue a la cromatografía de la mayoría de los métodos físicos y químicos de separación, es que se ponen en contacto dos fases mutuamente inmiscibles. Una fase es estacionaria y la otra móvil. Una muestra que se introduce en la fase móvil es transportada a lo largo de la columna (colector) que contiene una fase estacionaria distribuida. Las especies de la muestra experimentan interacciones repetidas (repartos) entre la fase móvil y la fase estacionaria. Cuando ambas fases se han escogido en forma apropiada los componentes de la muestra se separan gradualmente en bandas en la fase móvil. Al final del proceso los componentes separados emergen en orden creciente en interacción con la fase estacionaria. El componente menos retardado emerge primero, el retenido más fuertemente eluye al último.

La fase móvil puede ser un gas o un líquido, mientras que la fase estacionaria sólo puede ser un líquido o un sólido, como se muestra a continuación:

Cromatografía

Cuando la separación involucra predominantemente un reparto simple entre dos fases líquidas inmiscibles, una estacionaria y la otra móvil, el proceso se llama cromatografía líquido-líquido (LCC) . Cuando en la aptitud retentiva de la fase estacionaria intervienen principalmente fuerzas físicas de superficie, el proceso se denomina cromatografía líquido-sólido ( LSC, por sus siglas en inglés).

Otros dos métodos de cromatografía líquida difieren un poco en su modo de acción. En cromatografía de intercambio iónico ( IEC , por sus siglas en inglés), los componentes iónicos de la muestra se separan por el intercambio selectivo con contraiones de la fase estacionaria. En cromatografía de exclusión ( EC , de exclusión cromatography), la fase estacionaria proporciona una clasificación de moléculas basadas en su mayor parte en la geometría y el tamaño molecular. Este método también se llama cromatografía de permeación en gel, en la química de los polímeros y de filtración en gel, en la bioquímica.

Cuando la fase móvil es un gas, los métodos se llaman cromatografía gas-líquido (GLC) y cromatografía gas-sólido (GSC) .

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Clasificación de los métodos cromatográficos

La cromatografía puede ser definida como cualquier método de separación que depende de una absorción continua, partición o proceso de intercambio iónico; agrupa un conjunto importante y diverso de métodos, que permite separar componentes estrechamente relacionados en mezclas complejas, lo que en muchas ocasiones resulta imposible por otros medios.

Los métodos cromatográficos son hoy en día tan diversos que pocos de ellos muestran alguna similaridad con la técnica original.

Las técnicas cromatográficas pueden clasificarse de acuerdo a la disposición de la fase estacionaria como sigue:

Las técnicas cromatográficas son muy variadas, sin embargo, una característica que todas ellas tienen en común es su dependencia de la distribución de solutos entre dos fases, una de las cuales se encuentra en movimiento, por lo que se le conoce como fase móvil y que consiste en un fluido (gas, líquido o fluido supercrítico) cuya función es arrastrar a la muestra a través de una fase fija, conocida como fase estacionaria , constituida por un sólido o un líquido fijado en un sólido y que es inmiscible con la fase móvil.

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La cromatografía y los softwares de interpretación

La cromatografía es una técnica de separación extraordinariamente versátil que presenta distintas variantes.

En toda separación cromatográfica hay dos fases (sólida, líquida o gas) una móvil y otra estacionaria, que se mueven una con respecto de la otra manteniendo un contacto íntimo.

La muestra se introduce en la fase móvil y los componentes de la muestra se distribuyen entre la fase estacionaria y la móvil. Los componentes de la mezcla a separar invierten un tiempo diferente en recorrer cada una de las fases, con lo que se produce la separación.

Si un componente está la mayor parte del tiempo en la fase móvil el producto se mueve rápidamente, mientras que si se encuentra la mayor parte en la fase estacionaria, el producto queda retenido y su salida es mucho más lenta.

La más utilizada en química orgánica es cromatografía líquido-sólido en sus dos variantes: cromatografía en columna (CC) y cromatografía de capa fina (TLC)

Los análisis cromatográficos entregan una serie de datos que no siempre son sencillos de interpretar. Es por ello que numerosos softwares se han desarrollado para facilitar la interpretación de los datos.

PROTEC DR, S.A. – MEXICO ofrece software de cromatografía para facilitar la interpretación los resultados.

El sistema de datos cromatográficos AZUR

El sistema de datos cromatográficos AZUR ha sido diseñado para satisfacer los requerimientos de los laboratorios de cromatografía; provee al usuario de un interfaz gráfico común, útil para cualquier instrumento sin importar el fabricante.

AZUR es un novedoso sistema de datos cromatográficos de la más moderna tecnología de software, muy fácil de utilizar y a un precio alcanzable. Puede adquirir y procesar cromatogramas sin importar la marca del instrumento. Incluye un juego de herramientas, AzurBar, que lo hacen utilizable en cualquier cromatógrafo; todas las tareas son accesibles con un solo click, o mediante el ayudante AZURWizard que lo guía paso a paso para lograr una fácil configuración de todo el sistema.

Dos interfases de 24 bits de alta calidad (tarjeta PCI interna o interfaz USB externa) permiten al laboratorista la adquisición de hasta 6 canales de cualquier LC, GC, SFC o aún IC. Dentro de las amplias capacidades de proceso de cromatogramas están: integración gráfica, calibración multinivel, e importación y exportación de archivos.

El sistema OSIRIS

Asistente interactivo para HPLC Osiris es una novedosa herramienta para la transferencia

y validación de métodos HPLC. Permite crear nuevos métodos robustos (tanto en modo isocrático como de gradiente) a partir de pocos análisis preliminares, y optimiza las condiciones de la elusión. La función Wizard guía paso a paso durante el proceso. El analista puede modificar las condiciones de funcionamiento y definir sus propios criterios de optimización.

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